형광 공명 에너지 전달 (FRET)
형광 공명 에너지 전달 (FRET)은 기증자 여기 상태 에너지가 분자간 전기 커플의 상호 작용을 통해 수용체 여기 상태로 전달되는 비 방사성 에너지 전달 공정이다. 이 과정에는 광자가 포함되지 않으므로 방해가되지 않습니다. 이 분석은 빠르고 민감하며 단순한 이점이 있습니다.
FRET 분석에 사용 된 염료는 동일 할 수 있습니다. 그러나 대부분의 응용 분야에서는 다른 염료가 실제로 사용됩니다. 간단히 말해서, 발광 공진 에너지의 전달은 공여자 그룹이 흥분 될 때 공여자 (염료 1)로부터 수용체 (염료 2)로의 쌍둥이 쌍을 전달하는 것이다. 일반적으로, 공여자 형광 단체의 방출 스펙트럼은 수용체 그룹의 흡수 스펙트럼과 겹칩니다. "두 형광 단의 거리가 적절한 경우 (10-100a), 공여자에서 수용체로 형광 단 에너지를 전달하는 것이 관찰 될 수 있습니다." 에너지 전달 방법은 수용체의 화학 구조에 따라 다릅니다.
1. 분자 진동, 즉 에너지 전달의 빛이 사라진다. (수용체는 가벼운 Quencher입니다)
2. 방출은 수용체 자체보다 더 강해서 2 차 형광 스펙트럼에서 적색 편이를 초래한다.” (수용체는 빛나는 이미 터입니다).
공여체 그룹 (Edans) 및 수용체 유전자 (DABCYL)는 HIV 프로테아제의 천연 기질과 균일하게 연결되어 있으며, 기질이 분리되지 않으면 Dabcyl은 Edans를 퀴즈로 만들 수 있습니다. HIV-1 프로테아제 단절시, 에단은 더 이상 다칸에 의해 켄칭되지 않으며, 에단 루시퍼 라제는 이후에 검출 될 수있다. 프로테아제 억제제의 이용 가능성은 에단의 형광 강도의 변화에 의해 모니터링 될 수있다.
FRET 펩티드는 펩 티다 제 비특이적 성을 연구하기위한 편리한 도구이다. 반응 과정을 지속적으로 모니터링 할 수 있기 때문에 효소 활성을 검출하기위한 편리한 방법을 제공합니다. 공여체/수용체에 의한 펩티드 결합의 가수 분해 후 생성 된 광택은 나노 몰 농도에서 효소 활성의 척도를 제공한다. FRET 펩티드가 손상되지 않으면 내부 플래시가 갑자기 실종되었지만 공여자/수용체 반대편에 펩티드 결합이 파손되면 플래시를 방출하여 연속적으로 검출 될 수 있으며 효소 활성을 정량화 할 수 있습니다.
후 시간 : 2025-07-02