생물학적 연구에서는 일반적으로 긴 서열을 가진 폴리펩티드가 사용됩니다.서열에 60개 이상의 아미노산이 포함된 펩타이드의 경우 일반적으로 유전자 발현 및 SDS-PAGE를 사용하여 이를 얻습니다.그러나 이 방법은 시간이 오래 걸리고 최종 제품의 분리 효과도 좋지 않다.
긴 펩타이드 합성에 대한 과제와 솔루션
긴 펩타이드를 합성할 때 우리는 항상 문제에 직면하는데, 즉 합성 순서가 증가함에 따라 축합 반응의 입체 장애가 증가하고 반응이 완료되도록 반응 시간을 조정해야 한다는 것입니다.그러나 반응 시간이 길어질수록 부작용이 더 많이 발생하고 목적하는 펩타이드의 일부가 형성됩니다.이러한 잔류물 – 결핍된 펩타이드 사슬은 긴 펩타이드 합성에서 생성되는 주요 불순물입니다.따라서 긴 펩타이드를 합성할 때 우리가 극복해야 할 핵심 문제는 고품질의 반응 조건과 반응 방법을 탐구하여 아미노산 축합 반응을 더욱 포괄적이고 완전하게 만드는 것입니다.또한 반응시간을 줄이세요. 반응시간이 길어질수록 제어할 수 없는 부반응이 많아지고 부산물도 복잡해지기 때문입니다.따라서 다음 세 가지 사항을 요약한다.
마이크로파 합성을 사용할 수 있습니다. 통합이 쉽지 않은 합성 과정에서 발생하는 일부 아미노산의 경우 마이크로파 합성을 사용할 수 있습니다.이 방법은 놀라운 결과를 가져오며 반응 시간을 크게 단축하고 두 가지 주요 부산물의 형성을 줄입니다.
조각 합성 방법을 사용할 수 있습니다.: 일부 펩타이드가 일반적인 합성방법으로 합성이 어렵고 정제가 용이하지 않은 경우, 펩타이드의 특정 부분에 있는 여러 아미노산을 전체 축합하여 펩타이드 사슬 전체로 채택할 수 있습니다.이 방법은 합성의 많은 문제를 해결할 수도 있습니다.
Acylhydrazide 합성을 사용할 수 있습니다.: 펩타이드의 아실히드라지드 합성은 아미드 결합 형성 사이의 N 말단 Cys 펩타이드와 C 말단 폴리펩타이드 히드라지드 화학적 선택적 반응의 고체상 합성 방법으로 펩타이드 결합 방법을 달성합니다.이 방법은 펩타이드 사슬 내 Cys의 위치에 따라 전체 펩타이드 사슬을 여러 서열로 나누어 각각 합성하는 방법이다.최종적으로 액상축합반응을 통해 목적 펩타이드를 얻는다.이 방법은 긴 펩타이드의 합성 시간을 크게 단축시킬 뿐만 아니라 최종 제품의 순도도 크게 향상시킵니다.
긴 펩타이드 정제
긴 펩타이드의 특수성은 필연적으로 조 펩타이드의 복잡한 구성 요소로 이어집니다.따라서 HPLC로 긴 펩타이드를 정제하는 것도 어려운 과제입니다.아밀로이드 계열 폴리펩티드 정제 공정은 많은 경험을 흡수하여 긴 펩티드 정제에 성공적으로 사용되었습니다.새로운 장비 채택, 다중 정제 시스템의 혼합, 반복 분리 및 기타 경험 방법을 통해 장기간의 펩타이드 정제 성공률이 크게 향상되었습니다.
게시 시간: 2023년 4월 18일