HPLC 실패 및 솔루션이 가장 발생하기 쉬운 곳

고정밀 장비인 HPLC는 사용 중에 올바른 방법으로 작동하지 않으면 쉽게 귀찮은 작은 문제를 일으킬 수 있습니다.가장 일반적인 문제 중 하나는 열 압축 문제입니다.결함이 있는 크로마토그래프의 문제를 신속하게 해결하는 방법.HPLC 시스템은 주로 저장병, 펌프, 주입기, 컬럼, 컬럼 온도 챔버, 검출기 및 데이터 처리 시스템으로 구성됩니다.전체 시스템에서 기둥, 펌프 및 감지기는 문제가 발생하기 쉬운 주요 구성 요소이자 주요 위치입니다.

컬럼 압력의 핵심은 HPLC를 사용할 때 세심한 주의가 필요한 영역입니다.컬럼 압력의 안정성은 크로마토그래피 피크 모양, 컬럼 효율성, 분리 효율성 및 머무름 시간과 밀접한 관련이 있습니다.컬럼 압력 안정성은 압력 값이 안정된 값에서 안정적이라는 것을 의미하는 것이 아니라 압력 변동 범위가 345kPa 또는 50PSI 사이에 있음을 의미합니다(컬럼 압력이 안정적이고 천천히 변화하는 경우 기울기 용리 사용 가능).압력이 너무 높거나 너무 낮은 것은 컬럼 압력 문제입니다.

HPLC 실패 및 솔루션이 가장 발생하기 쉬운 곳

1, 고압은 HPLC 사용에서 가장 일반적인 문제입니다.이는 압력이 갑자기 상승한다는 것을 의미합니다.일반적으로 다음과 같은 이유가 있습니다. (1) 일반적으로 이는 흐름 채널 막힘으로 인해 발생합니다.이 시점에서 우리는 그것을 부분적으로 살펴보아야 한다.ㅏ.먼저 진공펌프의 입구를 차단합니다.이때 액체가 마음대로 떨어지는지 확인하기 위해 PEEK 튜브가 용매병보다 작게 되도록 액체를 채워 넣었다.액체가 떨어지지 않거나 천천히 떨어지면 솔벤트 필터 헤드가 막힌 것입니다.치료: 30% 질산에 30분 동안 담그고 초순수로 헹굽니다.액체가 무작위로 떨어지면 솔벤트 필터 헤드가 정상이며 점검 중입니다.비.Purge 밸브를 열어 이동상이 컬럼을 통과하지 않도록 하고, 압력이 크게 감소하지 않으면 필터 화이트 헤드가 막히게 됩니다.처리: 여과된 흰머리를 제거하고 10% 이소프로판올로 30분 동안 초음파 처리했습니다.압력이 100PSI 이하로 떨어진다고 가정하면 필터링된 화이트 헤드는 정상이며 점검 중입니다.씨.컬럼의 출구 끝을 제거하십시오. 압력이 감소하지 않으면 컬럼이 막힌 것입니다.처리: 완충염 막힘인 경우 압력이 정상이 될 때까지 95% 헹굽니다.더 잘 보존된 물질로 인해 방해가 발생한 경우 현재 이동상보다 더 강한 흐름을 사용하여 정상 압력으로 돌진해야 합니다.위의 방법으로 장기간 세척압력이 감소하지 않는다면 컬럼의 입구와 출구는 반대로 기기와 연결되어 있다고 볼 수 있으며, 이동상으로 컬럼을 세척할 수 있다.이때, 여전히 컬럼 압력이 감소하지 않으면 컬럼 입구 체판만 교체하면 되지만, 일단 작동이 좋지 않으면 컬럼 효과가 감소하기 쉬우므로 사용량을 줄이는 것이 좋습니다.어려운 문제의 경우 컬럼 교체를 고려할 수 있습니다.

(2) 잘못된 유량 설정: 올바른 유량을 재설정할 수 있습니다.

(3) 잘못된 유량비: 다양한 유량 비율의 점도 지수가 다르며 점도가 높은 유량의 해당 시스템 압력도 더 큽니다.가능하다면 점도가 낮은 용매를 교체하거나 재설정하여 준비할 수 있습니다.

(4) 시스템 압력 제로 드리프트: 액체 레벨 센서의 제로를 조정합니다.

2, 압력이 너무 낮습니다 (1)은 일반적으로 시스템 누출로 인해 발생합니다.해야 할 일: 각 연결부, 특히 컬럼 양쪽 끝의 인터페이스를 찾아 누출 영역을 조이십시오.포스트를 제거하고 적절한 힘으로 PTFE 필름을 조이거나 라이닝합니다.

(2) 가스가 펌프로 들어가지만 이때 압력은 일반적으로 높거나 낮거나 불안정합니다.더 심각한 것은 펌프가 유체를 흡수할 수 없다는 것입니다.처리 방법: 세척 밸브를 열고 3~5ml/min의 유속으로 세척합니다.그렇지 않은 경우 전용 니들 튜브를 사용하여 배기 밸브에서 기포를 흡입했습니다.

(3) 이동상 유출 없음: 저장병에 이동상이 있는지, 싱크가 이동상에 잠겨 있는지, 펌프가 작동 중인지 확인하십시오.

(4) 기준 밸브가 닫히지 않습니다. 감속 후 기준 밸브가 닫힙니다.보통 0.1까지 내려갑니다.기준 밸브를 닫은 후 ~ 0.2mL/분.

요약:

본 논문에서는 액체 크로마토그래피의 일반적인 문제만 분석합니다.물론 실제 적용에서는 더 많은 문제에 직면하게 될 것입니다.오류 처리에서는 다음 원칙을 따라야 합니다. 한 번에 하나의 요소만 변경하여 가상 요소와 문제 간의 관계를 결정합니다.일반적으로 문제 해결을 위해 부품을 교체할 때 낭비를 방지하기 위해 분해된 온전한 부품을 제자리에 다시 놓는 데 주의를 기울여야 합니다.좋은 기록 습관을 형성하는 것이 오류 처리 성공의 열쇠입니다.결론적으로, HPLC를 사용할 때에는 시료 전처리와 장비의 올바른 작동 및 유지 관리에 주의하는 것이 중요합니다.