단백질 발현의 개요

Proteinexpression은 표적 유전자를 인공 벡터로 재현 한 다음 이종 시스템에서 단백질을 발현하기 위해 수용자 세포 또는 세포가없는 시스템에이를 도입하는 기술을 말합니다.

단백질 발현은 천연 단백질이 얻기 어렵다는 문제를 해결할 수 있습니다. 1970 년대에 이종 단백질 발현의 첫 번째 확립 이후, 수천 개의 재조합 단백질이 성공적으로 발현되었으며, 이는 생명 공학 및 생물 의학 연구 및 산업의 지속적인 발달을 효과적으로 촉진합니다.

목적:

단백질 발현을 통해 먼저 천연 공급원으로부터 얻기 어려운 단백질을 얻는 것이 가능하다.

둘째, 단백질 발현 생성물의 큰 배치 및 고순도는 표적 단백질의 분석을 촉진 할뿐만 아니라 비용을 크게 줄입니다.

더 중요한 것은, 재조합 단백질은 일반적으로 숙주 세포의 높은 생체 안전성을 나타내도록 선택되어 병원성 숙주의 잠재적 인 생체 안전 위험을 피한다.

방법:

주로 유전자 단편 복제 과정, 발현 시스템으로의 소개, 유도 된 발현, 생성물 정제 및 분석을 포함한다.

단백질 발현의 개요

분류:

단백질 발현 시스템은 일반적으로 다음으로 나눌 수 있습니다.

1. 핵 발현 시스템 : 대장균은 가장 흔한 단백질 발현 시스템으로, 명확한 유전 적 배경, 편리한 재생산, 저비용 및 높은 발현의 장점을 갖는 가장 흔한 단백질 발현 시스템이다. 그러나, 번역 변형 메커니즘이없고 단백질 발현을 변형시키기위한 글리코 실화 또는 특수 선택점 절단에 적합하지 않다. Bacillus subtilis는 또한 단백질 발현에 사용될 수 있으며, 그 장점은 강한 대사 발현 능력과 낮은 프로테아제 활성이며 점차적으로 관심을 끌었다.

2. 진핵 생물 발현 시스템 : 번역 후 어느 정도의 글리코 실화가 달성 될 수 있으며, 이는 진핵 단백질의 자연 활성에 더 가깝다. 주로 포함됩니다. 효모 발현 시스템 (일반적인 붉은 효모, 양조 효모 등), 효모는 고밀도가 부드럽고, 번역 후 변형 될 수 있으며, 원핵 생물 및 진핵 생물 숙주 세포의 장점을 가지며 우수한 단백질 발현 시스템이다. ② 곤충 세포 발현 시스템 : 외인성 유전자는 발현을 위해 바큘로 바이러스 벡터에 의해 곤충 세포로 형질 감염됩니다. 이는 진핵 생물 단백질에 대한 높은 발현 시스템이며, 이는 막 단백질, 거대 분자 단백질, 단백질 키나제 및 원핵 생물 시스템에서 발현하기 어려운 다른 단백질에 적합합니다. mammalian 세포 발현 시스템 : 포유류 세포의 번역 및 장식 효율은 효모 및 곤충 세포 시스템의 변환보다 훨씬 높다. 포유 동물 세포의 구조와 기능은 천연 진핵 단백질에 더 가깝지만 발현 수준은 낮고 비용은 높습니다.

3. 세포가없는 발현 시스템 : 표적 단백질은 입자 및 PCR 생성물로부터 직접 발현 될 수 있으며, 발현 시스템은 대장균, 밀 배아, 토끼 망상 세포 등으로부터의 세포가없는 추출물이다. 세포가없는 단백질 발현의 장점은 다른 시스템에서 발현하기 어려운 생성물, 높은 처리량 및 자동화 및 높은 비용을 발현하는 능력이다.