재조합 단백질 항원은 종종 여러 다른 에피토프를 가지고 있으며, 그 중 일부는 서열 에피토프이고 일부는 구조적 에피토프입니다. 변성 항원으로 동물을 면역화하여 수득 된 폴리 클로 날 항체는 개별 에피토프에 특이적인 항체의 혼합물이며, 일반적으로 천연 구조 또는 변성 표적 단백질을 검출하는데 사용될 수있다. 면역 병원으로 변성 단백질을 사용하는 부작용은 변성 단백질이 더 면역 원성 인 경향이 있고 동물에서 강한 면역 반응을 자극 할 수 있다는 것입니다.
대장균의 발현 시스템은 일반적으로 항원 목적으로 선택됩니다. 시간과 돈 측면에서 가장 비용이 많이 드는 시스템이기 때문입니다. 표적 단백질 발현의 가능성 및 정제의 편의성을 향상시키기 위해, 때로는 특정 도메인과 같은 표적 단백질의 작은 단편만이 발현된다.
단백질의 3 차원 구조
단백질의 특정 도메인
항체 제조의 목적이 전적으로 WB 검출을위한 경우, 합성 소형 펩티드를 항원으로 사용하는 것이 경제적이고 빠르지 만, 부적절한 펩티드 세그먼트의 부적절한 선택으로 인해 약한 면역 원성 또는 비 재생성의 위험이있다. 항체 제조는 장기간을 필요로하기 때문에, 실험의 성공률을 보장하기 위해 폴리펩티드 항원을 사용하여 항체를 제조하기 위해 2 ~ 3 개의 상이한 펩티드 세그먼트가 선택된다.
면역을위한 폴리펩티드 항원의 순도는 80%이상이어야한다. 더 높은 순도는 이론적으로 더 나은 특이성을 갖는 항체를 얻을 수 있지만, 실제로, 동물은 항상 많은 수의 비특이적 항체를 생성하여 항원 순도의 이점을 가려줍니다.
또한, 작은 펩티드로부터의 항체의 제조는 면역 원성을 향상시키기 위해 적절한 담체 항원으로 가교되어야한다. 두 개의 일반적인 항원 담체는 KLH 및 BSA입니다.
후 시간 : 2025-07-03