단백질 정제는 조직, 세포 또는 단백질 혼합물로부터 특정 목적의 단백질 분획을 분리하는 과정이다. 단백질 정제는 분리 된 단백질의 강한 순도를 촉진 할뿐만 아니라 단백질의 생물학적 활성을 유지해야한다. 따라서, 상이한 단백질 특성에 따라 하나 이상의 조합 정제 체계를 설계해야한다. 단백질 정제의 주요 전략은 상이한 단백질 간의 유사성과 차이를 활용하는 것입니다. 단백질 사이의 유사성에 기초하여, 비 단백질 물질을 제거 할 수 있으며,이어서 단백질 차이에 기초하여 표적 단백질을 분리 할 수있다. 특히 유전자 공학 기술의 빠른 발달로 많은 단백질이 유전자 재조합에 의해 발현되지만 단백질 정제 수준은 단백질의 순도 및 활성과 직접 관련이 있습니다. 따라서, 단백질 정제는 현대 생명 공학에서 중요한 주제로 남아있다.
목적
한편으로, 단백질의 분리 및 정제는 단백질의 구조 및 기능에 대한 심층적 인 연구에 특히 중요하며, 다른 한편으로, 단백질의 분리 및 정제는 또한 단백질의 적용 효과와 직접 관련이있다. 따라서, 단백질 정제는 생물학적 과학의 연구 및 적용에 중요한 역할을하며, 단백질 분리 및 정제 기술은 또한 생물학적 산업의 핵심 기술이다.
길
단백질 정제의 원리는 생물학적 활성 및 화학적 무결성을 유지하면서 합리적인 효율, 속도, 수율 및 순도로 표적 단백질을 분리하는 것입니다. 주요 단계에는 실험 물질의 선택, 전처리, 단백질 추출, 조잡한 단백질 분류, 미세 단백질 분류 및 단백질 식별이 포함됩니다.
정제 과정은 다음에주의를 기울여야한다. 2. 저온에서 작동합니다. 3. 샘플에서 단백질 함량의 주요 수준을 유지하십시오.
분류
단백질 정제는 정제 방법의 유형에 따라 분류 될 수 있습니다.
I. 염 침착을 포함하여 염 침착, 단백질 표면의 고형 된 층을 파괴하고 소수성 영역을 노출시킨 다음 예비 정제의 목적을 달성하기 위해 증착을 포함한 침전 방법; 유기 용매를 사용하여 수분 활성을 줄이면 유기 증착은 단백질 표면의 응고 된 필름을 파괴하여 단백질 침전을 유발합니다. 강수량은 가벼운 정제 방법이지만 순도는 높지 않으며 1 차 정제 과정으로 사용될 수 있습니다.
투석 가방 및 한외 여과 방법을 포함한 두 가지 투석 방법. 투석 및 한외 여과에 의해, 소분자 불순물을 제거 할 수 있고, 단백질 용액도 대체 될 수있다.
3. 크로마토 그래피 방법에는 분자 체 겔 크로마토 그래피, 이온 교환 크로마토 그래피, 친 화성 크로마토 그래피 (금속 킬레이트 친 화성 크로마토 그래피, 단백질 A/G 크로마토 그래피, 수용체 단백질, 기질 등), 소수성 크로마토 그래피, 역 성능 및 고성능 액체 크로마토 그래피가 포함됩니다. 더 나은 결과를 달성하기 위해, 친 화성 크로마토 그래피 및 이온 교환 크로마토 그래피와 같은 두 가지 크로마토 그래피 방법의 조합이 종종 필요하다.
상기 방법 외에도, 밀도 구배 원심 분리와 같은 다른 많은 정제 방법이 있으며, 이는 고순도 단백질의 생산에 적합하지만 더 높은 실험 조건이 필요합니다. 단백질 결정은 X- 전달과 같은 생물학적 구조 분석에 적합합니다.
후 시간 : 2025-07-01