재조합 단백질 항원은 종종 여러 가지 서로 다른 에피토프를 가지며, 그 중 일부는 서열 에피토프이고 일부는 구조적 에피토프입니다.변성항원으로 동물을 면역시켜 얻은 다클론항체는 개별 에피토프에 특이적인 항체의 혼합물로 일반적으로 천연 구조나 변성된 표적 단백질을 검출하는 데 사용할 수 있다.변성 단백질을 면역원으로 사용하는 것의 부작용은 변성 단백질이 더 면역원성이 있는 경향이 있고 동물에서 강력한 면역 반응을 자극할 수 있다는 것입니다.
대장균의 발현 시스템은 시간과 비용 측면에서 가장 비용이 많이 드는 시스템이기 때문에 일반적으로 항원 목적으로 선택됩니다.목적 단백질의 발현 가능성과 정제의 편의성을 높이기 위해 특정 도메인과 같은 목적 단백질의 작은 단편만을 발현시키는 경우도 있습니다.
단백질의 3차원 구조
단백질의 특정 도메인
항체 제제의 목적이 wb 검출만을 위한 것이라면, 합성된 작은 펩타이드를 항원으로 사용하는 것이 경제적이고 신속하지만, 펩타이드 세그먼트의 부적절한 선택으로 인해 면역원성이 약하거나 재생성이 떨어질 위험이 있습니다.항체 준비에는 오랜 기간이 필요하기 때문에 실험의 성공률을 보장하기 위해 폴리펩티드 항원을 사용하여 항체를 준비하기 위해 2개 또는 3개의 서로 다른 펩티드 세그먼트를 선택하는 경우가 많습니다.
면역화를 위한 폴리펩티드 항원의 순도는 80% 이상이어야 합니다.이론적으로는 순도가 높을수록 특이성이 더 높은 항체를 얻을 수 있지만 실제로는 동물이 항상 비특이적 항체를 많이 생성하므로 항원 순도의 이점이 가려집니다.
또한 작은 펩타이드로부터 항체를 제조하려면 면역원성을 강화하기 위해 적절한 운반체 항원과 교차 연결되어야 합니다.두 가지 일반적인 항원 운반체는 KLH와 BSA입니다.
게시 시간: 2023년 3월 23일